摘要
目的：比较药对青皮-陈皮与其单味药的挥发性成分。
方法：采用水蒸气蒸馏法分别提取青皮、陈皮饮片及药对挥发油，应用气相色谱-质谱联用技术对各样品成分进行分析比较，峰面积归一化法计算百分含量。
结果：青皮主要成分为β-橄榄烯，占其挥发油总量的19.76%。陈皮主要成分为α-金合欢烯，占其挥发油总量的20.32%， 药对主要成分为1-石竹烯，占其挥发油总量的21.01%。组成药对后，单味药青皮消失12种组分，陈皮消失30种组分。
结论：药对中挥发油的成分主要来自陈皮，单味药中的一些挥发油成分在药对中消失。青皮、陈皮药对配伍对所提挥发油的成分和含量都有一定的影响，药对中其种类与含量变化并不等于两种单味药的简单相加。
关键词：青皮；陈皮；挥发油；GC-MS ；药对
Abstract
Objective: To compare the volatile components of green peel and its peel.
Methods: The organic oil and volatile oil were extracted by gas chromatography and mass spectrometry and calculated by peak area normalization.
Results: The main component of green skin was β -olivene, accounting for 19.76% of the total volatile oil. The main component of tangerine peel is α -Acacia ene, accounting for 20.32% of the total volatile oil, and the main component of medicinal peel is 1-bamboo, accounting for 21.01% of the total volatile oil. After the drug pair, 12 components of green peel disappeared and 30 components of tangerine peel disappeared.
Conclusion: The components of the volatile oil in the drug pair mainly come from tangerine peel, and some volatile oil components in the single drug disappear in the drug pair. The compatibility of green peel and tangerine peel drugs has a certain influence on the composition and content of the volatile oil, and the change of the type and content of the drugs are not equal to the simple addition of the two single drugs.
Key words: Green bark; Tangerine peel; Volatile oil ;GC-MS; Drug pair
前言
陈皮和青皮都属于芸香科植物橘及其栽培变种，二者各有所长，为中医临床常用理气药，而且药用历史悠久。橘在我们的生活中很常见，且用药广泛又经济。尤其是在民间，为了使越来越多的人了解并且能更深入的认识陈皮和青皮这两味中药，可以保护和有效利用这些资源，如今，随着人们对健康的日益重视，陈皮和青皮被越来越多的人所熟知，也更多被用在人们生活和临床治疗中。陈皮与感冒药配伍可增强疗效；以陈皮为原料可加工成食品、饮料及保健品[1]，都备受欢迎；提取陈皮中的成分还能制成香薰或化妆品；陈皮还可以作为香料或调味料，在炖肉、煲汤、炒菜时放入，可以提香、增鲜、除异味，还有助于食物的消化。有文献指出，陈皮还可应用于临床，如预防术后腹胀、预防和治疗肿瘤、治疗高血压与冠心病以及功能性消化不良等[2]。
在我们日常生活中，青皮可做成药膳来调理身体。以青皮、生山楂和粳米为原料来煮粥，制成的青皮山楂粳米粥，有疏肝理气、解郁散结的功效；在炖猪蹄时加入青皮和橘叶，可以行气通乳，有效缓解产妇因心情不畅、肝郁气滞而乳汁不下。当然，青皮也可以用到医用处方中。用适量中药青皮、柴胡、生枳壳、川朴、黄芩、苦桔梗、草果、槟榔、荷叶梗、炙草水煎取汁，早晚分服，可用于治疗流行性感冒和疟疾[4]。这些说明，陈皮和青皮作为常用理气中药，已经被应用到现代生活和医疗中，它们的利用价值很高，具有重要的研究意义。
陈皮和青皮虽同出一源，但在药效和临床应用上也有所差别，是中药材中“一体二用”的典型代表。陈皮最早以“橘柚”之名始载于《神农本草经》，异名“橘皮”，归为木部，列为上品，味辛、苦，性温，归脾、胃、肺经[5]。陈皮以贮存的时间越久越好，正所谓“橘皮用陈久者良”。陈皮也是不可多得的药食同源的天然保健品。青皮始载于《珍珠囊》，味苦、辛，性温，归肝、胆、胃经[6]。
陈皮中含有大量黄酮类成分，而青皮中黄酮类成分的种类虽与陈皮相似，但含量与陈皮相比也略有不同[4]。青皮中总黄酮类成分高达25%。黄酮类成分还具有多种生理活性，可以预防心脑血管疾病、降低血脂和胆固醇、抗菌消炎、抗氧化等[7]。青皮、陈皮共有的生物碱类成分是辛弗林和N-甲基酪胺，二者均为对羟基苯乙胺类生物碱，具有强心升压、抗休克、抑制小鼠肺纤维细胞増殖等作用。辛弗林具有刺激代谢和产热的作用，有研究表明青皮中的辛弗林含量高于陈皮[8]。陈皮和青皮中还富含人体所必需的营养成分，如类胡萝卜素、肌醇、蛋白质、果胶、多糖、有机酸类等。青皮和陈皮中含有的有机酸类主要有没食子酸、丁香酸、水杨酸、香草醛酸、羟基苯甲酸、反式对羟基肉桂酸、咖啡酸、肉桂酸等。此外，青皮和陈皮中还含有钙(Ca)、钠(Na)、钾(K)、镁(Mg)、铜(Cu)等微量元素[9]。
青皮和陈皮中含有大量的萜类化合物，包括单萜、倍半萜、二萜和其他的含氧衍生物及部分高度氧化的柠檬苦素类四环三萜类，如诺米林、柠檬苦素等[10]，以柠檬烯为主要成分。其中单萜、倍半萜、二萜等具有挥发性，与青皮和陈皮中其他具有挥发性的化合物共同被称为挥发油。挥发油作为植物界的重要组成部分，分布十分广泛，目前国内就已经有几百种野生和栽培的含挥发油的植物。药材来源、采收期、贮藏时间、不同加工方式等因素对挥发油类成分的含量影响较大，虽然青皮和陈皮属于同一物种来源的药材，但由于二者采收期不同，它们挥发油中主要成分的含量也有所差别[11]。
挥发油(essentialoils)也可称精油，是存在于植物中一类化合物，具有特殊的芳香气味，可通过水蒸气蒸馏法将其提取出来，与水互不相溶。挥发油所含成分相当复杂，常以萜类成分为主，亦包括了小分子脂肪族物质和小分子芳香族物质。挥发性油类是陈皮多种药理作用的物质基础，因陈皮、青皮药材被广泛应用于临床，从而引发了广大研究者对其挥发性化学成分进行更加深入的分析研究。龚范等人采用GC-MS技术测定陈皮中的挥发性化学成分，共鉴定出其中的34种挥发性物质，挥发性化学组分中相对含量较高的有D-柠檬烯、β-月桂烯、β-松油烯等。广陈皮的质量容易受到产地、品种和贮存环境等的影响，故其挥发性成分的含量及组成特征会因产地、贮藏年份和品种的不同产生一定的变化。严寒静等人检测了不同贮存年份广陈皮挥发性物质的组成成分和相对含量，明确指出不同贮存年份广陈皮挥发性物质成分和相对含量的变化存在一定的规律，分子量较小的挥发性成分呈现减少的趋势，而分子量较大的成分则相反，呈现增加的趋势。高蓓等人分析鉴定了不同贮藏年份中广陈皮的挥发性成分，其中有26个萜烯类化合物、10个醛类化合物、10个醇类化合物、还有醌类、酮类和酚类化合物各3个、2个和1个。根据分析明确了陈皮挥发性化学成分中的主要组分是萜烯类化合物，其中D-柠檬烯、γ-松油烯、β-月桂烯、α-蒎烯是其中最主要的组成成分，并且随着贮藏年限的延长，陈皮中的挥发油总量逐渐减少。但不同的化合物组分有不同的变化规律，D-柠檬烯的相对含量随着贮藏年份的增加逐渐降低，而α-蒎烯的含量则呈现增加的趋势。刘丽娜等分析了1年、5年、15年3个不同贮藏年份陈皮的挥发油成分，分别检测出34种、38种、39种化合物，指出在一定的贮藏时间内，陈皮挥发油成分的组成及其含量随着贮藏年份的增加发生了显著变化。
挥发性成分检测方法主要有以下几种：吹扫捕集是一种动态顶空技术，属于气相萃取的范畴。其原理是利用流动气体(如氮气、氦气或其他惰性气体)将固体或液体样品中的挥发性化学成分吹提出来，并将吹提出来的挥发性成分富集于捕集阱，经过升温，使捕集阱中的挥发性化学组分解吸，随后进入气相色谱仪，进行色谱分析。吹扫捕集技术在无需要使用有机溶剂对样品进行前处理，对环境污染较小，优点是取样量少、富集效率高。气相色谱法(gaschromatography；GC)是以气体为流动相的一种色谱方法，主要用于分离分析挥发性化合物。分离效能好，灵敏度高，选择性强，操作简单快速，是分析中药挥发性成分常用的方法。质谱法(massspectrometry；MS)是应用多种离子化技术，将物质由分子转化为气态离子，并按照所得气态离子荷质比(m/z)的大小对其进行分离并记录相应的信息，从而对物质结构进行分析的方法。其优点是响应时间短、灵敏度高、信息量大等，该技术是化学、药学等各个领域进行分析鉴定的重要手段。气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术综合利用上述两种手段对挥发性化合物进行分离分析，鉴定出其中所含的挥发性化学成分。
近年来，各国都在进一步探索青皮和陈皮的新用途，研究以我国与日本最为深入。本次实验应用GC-MS技术对青皮和陈皮及其药对的挥发油成分比较分析，因挥发油具有沸点低、易挥发的特点，特别适用于水蒸气蒸馏法制得。同时对获得的总离子流色谱图进行解析，并对鉴定出的两味单味药及其药对中的化学成分进行分析，观察三者之间化学成分的异同以及含量多少的变化。研究结果为青皮陈皮这两味单味药配伍后药对所含化学物质变化的机制及其对药理作用影响的相关研究提供了理论基础。
1 仪器 试剂和材料
1.1 仪器
1.2 试剂与材料
2 实验方法
2.1挥发油的提取
本次实验应用青皮、陈皮两种药材，产地分别位于湖南胜沅江市三眼塘镇和湖南省衡阳市。通过前期查阅的相关文献得知青皮-陈皮药对挥发油的最佳提取工艺为：将中药材粉碎后加入10倍量水，浸泡两个小时，采用水蒸气蒸馏提取法提取7h，并按配比青皮、陈皮1:1的比例组成药对后提取挥发油。实验前将青皮、陈皮两位药材粉碎，过80目筛。实验前准确称取50g青皮、50g陈皮和50g按1:1比例称量的青皮和陈皮。后将称量好的供试药材分别放置于500ml圆底烧瓶中，再依次加入500mL蒸馏水，浸泡2 h后通入水蒸气蒸馏，蒸馏过程注意严格控制温度，药材中的挥发性成分随水蒸气蒸馏而带出，经冷凝后收集馏出液，提取7小时 。自然冷却后接收挥发油，挥发油呈无色透明状，具有特殊香味，加入无水 Na2SO4 适量脱水，精细测定青皮和陈皮挥发油体积，后将提取获得的挥发油储存在4℃冰箱中，备用。
2.2供试品溶液的制备
按照1:1比例称取青皮药材和陈皮药材共50g，粉碎混合后，按照查阅文献得知的最佳提取工艺，浸泡2h，直接加入10倍量水，提取七个小时，收集挥发油，待用；取青皮50g粉碎后，按照上述步骤，收集青皮挥发油，待用；取陈皮50g粉碎后，按照上述步骤，收集陈皮挥发油，待用。气相色谱法常用的溶剂有乙醚和正己烷两种。本实验首先以乙醚为溶剂进行考察，结果发现以乙醚为溶剂进样，出峰较少，且基线漂移明显。后以正己烷为溶剂进行考察，发现出峰较多，各峰分离情况较好，基线平稳。最终选定以正己烷为溶剂进行供试液的配制。精密称定上述提取青皮挥发油、陈皮挥发油和青皮-陈皮药对挥发油样品各0.2g，分别用正己烷定容至10ml，置分液漏斗中萃取后取上层溶液，备用。
2.3气相色谱-质谱(GC-MS)测定
2.3.1 气相色谱条件
色谱柱：HP-5MS毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 µm）；载气为氦气；流速1.0 mL·min-1；分流比50:1；样量1 µL；进样口和接口温度均280 ℃。后运行时间10 min，溶剂延迟3.75 min。
2.3.2 质谱条件
离子源为EI源，离子源温度230 ℃，四极杆温度150 ℃，电子能量70 eV，倍增电压1671 V，数据采集模式为全扫描，质量范围30~450 amu。Scans/sec为3.42。
2.3.3 升温程序
50℃起以4℃升温，140℃（15min），溶液以4℃升温至260℃，分流比50:1，进样量：1μL，进样口温度280℃，接口温度280℃，溶剂延迟时间3.75min，m/z：30/450，scans：sec=3.42 ，溶液稀释10倍。
2.4 样品的测定及分析
分析质谱工作站中分离出的各个色谱峰，结合计算机检索，必要时加以人工辅助，将得到的色谱峰与NIST08谱库中检测相似的质谱图进行对比。最后确定各个色谱峰的化学成分，并计算各个组分的百分含量。
3 实验结果与讨论
3.1挥发油总离子流色谱
分别将青皮、陈皮以及青皮-陈皮药对挥发油供试品通过气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）得到相应的色谱、质谱数据，各样品 GC-MS 总离子流图见图3-1、3-2、3-3。
3.1.1陈皮挥发油总离子流色谱
图 1:青皮挥发油化学成分GC-MS总离子流图
通过GC-MS仪将提取得到的青皮挥发油鉴定和分离，获得青皮挥发油的化学组分GC-MS总离子流色谱图，见上图1。
3.1.2青皮挥发油总离子流色谱图分析
图 2:陈皮挥发油化学成分GC-MS总离子流图
通过 GC-MS 仪将提取得到的陈皮挥发油分离和鉴定，获得陈皮挥发油的化学组分GC-MS总离子流色谱图，见上图2。
3.1.3青皮-陈皮药对挥发油总离子流色谱
图 3:药对青皮-陈皮挥发油化学成分GC-MS总离子流图
通过 GC-MS 仪将提取得到的青皮-陈皮药对挥发油分离和鉴定，获得青皮-陈皮药对挥发油的化学组分GC-MS总离子流色谱图，见上图3。
3.2挥发油的化学成分
分析GC-MS总离子流色谱图，同时应用计算机检索技术，把获得的化合物质谱图和NIST谱库进行匹配 ，进而确定挥发油中的化学组分，并采用峰面积归一化法对各组分的相对含量进行定量分析。按照保留时间的顺序，将青皮、陈皮和药对陈皮-青皮挥发油成分的分析结果列于表1。
表3-1青皮和陈皮及其药对挥发油中化学成分分析结果
| 序号 | t/min | 英文名称 | 化合物名称 | 分子式 | 单味药青皮% | 单味药陈皮% | 药对% |
| 1 | 6.223 | 1R-.alpha.-Pinene | (1R)-(+)-α蒎烯 | C10H16 | 0.382 | ||
| 2 | 7.406 | .beta.-Pinene | β-蒎烯 | C10H16 | 0.216 | ||
| 3 | 8.598 | 1,3-Cyclohexadiene,1-methyl-4-(1-methylethyl) | α-松油烯 | C10H16 | 0.144 | ||
| 4 | 8.792 | Benzene, 1-methyl-4-(1-methylethyl | p-伞花烃 | C10H14 | 0.457 | 1.402 | 0.6313 |
| 5 | 8.983 | D-Limonene | d-柠檬烯 | C10H16 | 5.241 | 9.2202 | |
| 6 | 9.880 | 1,4-Cyclohexadiene, 1-methyl-4-(1-methylethyl) | 萜品烯 | C10H16 | 0.824 | 0.7364 | |
| 7 | 9.947 | 1R-.alpha.-Pinene | (1R)-(+)-α蒎烯 | C10H16 | 5.264 | ||
| 8 | 10.911 | Cyclohexene, 1-methyl-4-(1-methylethylidene)- | 萜品油烯 | C10H16 | 0.522 | ||
| 9 | 11.276 | 1,6-Octadien-3-ol, 3,7-dimethyl- | 芳樟醇 | C10H18O | 0.277 | ||
| 10 | 12.620 | (3E,5E)-2,6-dimethylocta-1,3,5,7-tetraene | (3E,5E)-2,6-二甲基-1,3,5,7-辛四烯 | C10H14 | 0.091 | ||
| 11 | 13.900 | 3-Cyclohexen-1-ol, 4-methyl-1-(1-methylethyl)- | 4-萜烯醇 | C10H18O | 0.201 | ||
| 12 | 14.855 | Decanal | 癸醛 | C10H20O | 1.138 | ||
| 13 | 15.298 | 2-Cyclohexen-1-ol,2-methyl-5-(1-methylethenyl)-,cis- | 顺式香芹醇 | C10H16O | 0.178 | ||
| 14 | 17.557 | Bicyclo[2.2.1]heptan-2-ol, 1,7,7-trimethyl-, acetate, (1S-endo)- | 乙酸龙脑酯 | C12H20O2 | 0.147 | ||
| 15 | 18.058 | Phenol, 2-methyl-5-(1-methylethyl) | 香芹酚 | C10H14O | 0.113 | ||
| 16 | 18.243 | octadecanal | 硬脂烷醛 | C18H36O | 0.215 | ||
| 17 | 18.448 | 2-Methoxy-4-vinylphenol | 4-乙烯基-2-甲氧基苯酚 | C9H10O2 | 0.145 | ||
| 18 | 19.266 | Cyclohexene, 4-ethenyl-4-methyl-3- (1-methylethenyl)-1-(1-methylethyl )-, (3R-trans)- | δ-榄香烯 | C15H24 | 0.931 | 1.467 | |
| 19 | 19.650 | .alpha.-Cubebene | (-)-α-荜澄茄油烯 | C15H24 | 0.211 | ||
| 20 | 19.753 | 2,6-Octadiene,2,6-dimethyl- | 甲基香叶醇 | C10H18 | 0.43 | ||
| 21 | 20.001 | Eugeno1 | 丁香酚 | C10H12O2 | 13.2526 | ||
| 22 | 20.118 | 2,6-Octadien-1-ol,3,7-dimethyl-, acetate, (z)- | 乙酸橙花酯 | C12H20O2 | 1.081 | ||
| 23 | 20.441 | Copaene | α-蒎烯 | C15H24 | 1.278 | 1.7047 | |
| 24 | 20.998 | Cyclohexane, 1-ethenyl-1-methyl-2,4-bis(1-methylethenyl)-, (1.alpha.,2.beta.,4.beta.) | β-榄香烯 | C15H24 | 11.262 | 4.275 | 3.456 |
| 25 | 21.510 | Dodecanal | 十二醛 | C12H24O | 0.436 | ||
| 26 | 21.836 | Caryophyllene | 1-石竹烯 | C15H24 | 2.758 | 1.062 | 20.5332 |
| 27 | 22.313 | gamma-elemene | γ-榄香烯 | C15H24 | 0.539 | ||
| 28 | 22.474 | Azulene,1,2,3,4,5,6,7,8-octahydro-1,4-dimethyl-7-(1-methylethenyl)-, [1S-(1.alpha.,4.alpha.,7.alpha.)]- | α-愈创木烯 | C15H24 | 0.203 | ||
| 29 | 22.894 | a-Caryophyllene | α-石竹烯 | C15H24 | 3.034 | 1.975 | 4.308 |
| 30 | 23.631 | Naphthalene, decahydro-4a-methyl-1-methylene-7-(1-methylethylidene)-,(4aR-trans) | γ-蛇床烯 | C15H24 | 1.489 | 0.939 | |
| 31 | 23.852 | Germacrene D | 吉玛烯D | C15H24 | 3.708 | ||
| 32 | 23.901 | 1,6-Cyclodecadiene,1-methyl-5-methylene-8-(1-methylethyl)-, [S-(E,E)]- | 香叶烯D | C15H24 | 3.302 | 2.7225 | |
| 33 | 24.037 | Naphthalene, decahydro-4a-methyl-1-methylene-7-(1-methylethenyl)-, [4aR-(4a.alpha.,7.alpha.,8a.beta.)] | β-蛇床烯 | C15H24 | 3.146 | ||
| 34 | 24.086 | Naphthalene, decahydro-4a-methyl-1-methylene-7-(1-methylethenyl)-,[4aR-(4a.alpha.,7.alpha.,8a.beta.)]- | (+)-β-芹子烯 | C15H24 | 1.388 | ||
| 35 | 24.356 | Naphthalene, 1,2,3,4,4a,5,6,8a-octahydro-4a,8-dimethyl-2-(1-methylethenyl)-, [2R-(2.alpha.,4a.alpha.,8a.beta.)] | α-蛇床烯 | C15H24 | 3.696 | 2.373 | |
| 36 | 24.592 | .alpha.-Muurolene | α-依兰油烯 | C15H24 | 0.893 | 0.570 | |
| 37 | 24.900 | alpha.-Farnesene | α-金合欢烯 | C15H24 | 8.805 | 9.617 | 3.0577 |
| 38 | 25.132 | Naphthalene,1,2,4a,5,6,8a-hexahydro-4,7-dimethyl-1-(1-methylethyl)- | α-紫穗槐烯 | C15H24 | 0.274 | ||
| 39 | 25.478 | Naphthalene, 1,2,3,5,6,8a-hexahydro-4,7-dimethyl-1-(1-methylethyl)-, (1S-cis)- | Δ-杜松烯 | C15H24 | 5.870 | 4.326 | 3.9268 |
| 40 | 25.911 | Naphthalene,1,2,3,4,4a,7-hexahydro-1,6-dimethyl-4-(1-methylethyl)- | 荜澄茄油烯 | C15H24 | 0.142 | ||
| 41 | 27.002 | beta.-Humulene | β-葎草烯 | C15H24 | 0.545 | ||
| 42 | 27.357 | Dodecanoic acid | 月桂酸 | C12H24O2 | 0.454 | ||
| 43 | 30.946 | Cycloisolongifolene,8,9-dehydro | 8，9-脱氢环异长叶烯 | C15H22 | 20.4711 | ||
| 44 | 32.835 | 1H-Cyclopropa[a] naphthalene, 1a,2,3,3a,4,5,6,7b- Octahydro-1,1,3a,7 -tetramethyl-, [1aR-(1a.alpha.,3a. Alpha.,7b.alpha.)] | β-橄榄烯 | C15H24 | 15.411 | 5.8824 | |
| 45 | 48.546 | 5,9,13-Pentadecatrien-2-one, 6,10,14-trimethyl-, (E,E)- | 法尼基丙酮 | C18H30O | 0.154 | ||
| 46 | 48.859 | Hexadecanoic acid, methyl ester | 棕榈酸甲酯 | C17H34O2 | 0.078 | ||
| 47 | 50.206 | n-Hexadecanoic acid | 棕榈酸 | C16H32O2 | 7.548 | 1.014 | 7.0657 |
| 48 | 53.874 | 9,12-Octadecadienoic acid, methylester | 9，12-十八碳二烯酸甲酯 | C19H34O2 | 0.092 | ||
| 49 | 54.027 | Pentadecane | 正十五烷 | C15H32 | 0.241 | ||
| 50 | 55.091 | 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z)- | 亚油酸 | C18H32O2 | 0.459 | 0.109 | 0.5936 |
| 51 | 55.225 | cis-Vaccenic acid | 十八烷酸 | C18H34O2 | 0.8596 | ||
| 51 | 55.227 | 9-Octadecenoic acid, (E) | 反油酸 | C18H34O2 | 0.470 | ||
| 52 | 55.788 | Octadecanoic acid | 硬脂酸 | C18H36O2 | 0.157 | ||
| 53 | 58.823 | Eicosane | 正二十烷 | C20H42 | 0.1616 | ||
| 54 | 63.011 | Hexadecane | 正十六烷 | C16H34 | 0.124 |
根据表1的数据显示，单味药青皮共有24种化学成分被鉴定出且除棕榈酸甲酯和9，12-十八碳二烯酸甲酯外百分含量均大0.1%，含量较高的有β-榄香烯(43.84%)、β-橄榄烯（15.411%）等。从陈皮中共鉴定出39种化学组分，其百分含量均高于0.1%，鉴定出的39种化学成分中(1R)-(+)-α蒎烯（5.264%）、β-榄香烯（4.275%）、α-金合欢烯（9.617%）和Δ-杜松烯（4.326%）等所占比例较高。药对青皮-陈皮挥发油中被鉴定出来的且百分含量高于0.1%的化学成分共有17种，其中丁香酚（13.2526%）、1-石竹烯（20.5332%）、 8，9-脱氢环异长叶烯（20.4711%）等相对含量较高。
表3-2青皮和陈皮挥发油共有成分分析结果
| 序号 | t/min | 化合物名称 | 分子式 | 单味药青皮% | 单味药陈皮% | |||
| 1 | 8.792 | p-伞花烃 | C10H14 | 0.457 | 1.402 | |||
| 2 | 19.2656 | δ-榄香烯 | C15H24 | 0.931 | 1.467 | |||
| 3 | 20.998 | β-榄香烯 | C15H24 | 11.262 | 4.275 | |||
| 4 | 21.836 | 1-石竹烯 | C15H24 | 2.758 | 1.062 | |||
| 5 | 22.894 | α-石竹烯 | C15H24 | 3.034 | 1.975 | |||
| 6 | 23.631 | γ-蛇床烯 | C15H24 | 1.489 | 0.939 | |||
| 7 | 24.356 | α-蛇床烯 | C15H24 | 3.696 | 2.373 | |||
| 8 | 24.5918 | α-依兰油烯 | C15H24 | 0.893 | 0.57 | |||
| 9 | 24.900 | α-金合欢烯 | C15H24 | 8.805 | 9.617 | |||
| 10 | 25.4779 | Δ-杜松烯 | C15H24 | 5.870 | 4.326 | |||
| 11 | 50.2058 | 棕榈酸 | C16H32O2 | 7.548 | 1.014 | |||
| 12 | 55.091 | 亚油酸 | C18H32O2 | 0.459 | 0.109 | |||
由表3-2可知，青皮和陈皮的挥发油中有12种相同的化学成分，分别为p-伞花烃、δ-榄香烯、β-榄香烯、1-石竹烯、α-石竹烯、γ-蛇床烯、α-蛇床烯、α-依兰油烯、α-金合欢烯、△-杜松烯、棕榈酸、亚油酸，其在青皮中的百分含量分别为0.457%、0.931%、11.262%、2.758%、3.034%、1.489%、3.696%、0.893%、8.805%、5.879%、7.548%、0.459%，在陈皮中的百分含量分别为1.402%、1.467%、4.275%、1.062%、1.975%、0.939%、2.373%、0.57%、9.617%、4.326%、1.014%、0.109%。
表3-3青皮和青皮–陈皮药对挥发油共有成分分析结果
| 序号 | t/min | 化合物名称 | 分子式 | 单味药青皮% | 药对% |
| 1 | 8.792 | p-伞花烃 | C10H14 | 0.457 | 0.6313 |
| 2 | 8.983 | d-柠檬烯 | C10H16 | 5.241 | 9.2202 |
| 3 | 9.880 | 萜品烯 | C10H16 | 0.824 | 0.7364 |
| 4 | 20.441 | α-蒎烯 | C15H24 | 1.278 | 1.7047 |
| 5 | 20.998 | β-榄香烯 | C15H24 | 11.262 | 3.456 |
| 6 | 21.836 | 1-石竹烯 | C15H24 | 2.758 | 20.5332 |
| 7 | 22.894 | α-石竹烯 | C15H24 | 3.034 | 4.308 |
| 8 | 24.900 | α-金合欢烯 | C15H24 | 8.805 | 3.0577 |
| 9 | 25.478 | Δ-杜松烯 | C15H24 | 5.870 | 3.9268 |
| 10 | 32.835 | β-橄榄烯 | C15H24 | 15.411 | 5.8824 |
| 11 | 50.206 | 棕榈酸 | C16H32O2 | 7.548 | 7.0657 |
| 12 | 55.091 | 亚油酸 | C18H32O2 | 0.459 | 0.5936 |
由表3-3可知，在青皮挥发油和药对挥发油中有12种化学成分同时存在，分别为 共占药对挥发油总量的61.994%。在青皮挥发油中，这12种化合物共占总量的80.452%。这12种化学成分中有3种化学成分的百分含量在药对挥发油中明显升高，4种化学成分的百分含量在药对挥发油中明显降低，另外5种化学成分则没有显著变化。
表3-4陈皮和青皮–陈皮药对挥发油共有成分分析结果
| 序号 | t/min | 化合物名称 | 分子式 | 单味药陈皮% | 药对% |
| 1 | 20.998 | β-榄香烯 | C15H24 | 4.275 | 3.456 |
| 2 | 21.836 | 1-石竹烯 | C15H24 | 1.062 | 20.5332 |
| 3 | 22.894 | α-石竹烯 | C15H24 | 1.975 | 4.308 |
| 4 | 23.901 | 香叶烯D | C15H24 | 3.302 | 2.7225 |
| 5 | 24.900 | α-金合欢烯 | C15H24 | 9.617 | 3.0577 |
| 6 | 25.478 | Δ-杜松烯 | C15H24 | 4.326 | 3.9268 |
| 7 | 50.206 | 棕榈酸 | C16H32O2 | 1.014 | 7.0657 |
| 8 | 55.091 | 亚油酸 | C18H32O2 | 0.109 | 0.5936 |
由表3-4可知，在陈皮挥发油和药对挥发油中有8种化学成分同时存在。分别为共占药对挥发油总量的%。这8种共有成分在药对挥发油中占据%，在陈皮挥发油中占据%。这8种成分的含量随着药对配伍后，有3种化合物的百分含量在药对挥发油中明显升高，3种化学成分的百分含量在药对挥发油中明显降低，另外两种化学成分的百分含量则没有显著变化。
表3-5青皮、陈皮和青皮–陈皮药对挥发油共有成分分析结果
| 序号 | 化合物名称 | 分子式 | 单味药青皮% | 单味药陈皮% | 药对% |
| 1 | p-伞花烃 | C10H14 | 0.457 | 1.402 | 0.6313 |
| 2 | β-榄香烯 | C15H24 | 11.262 | 4.275 | 3.456 |
| 3 | 1-石竹烯 | C15H24 | 2.758 | 1.062 | 20.5332 |
| 4 | α-石竹烯 | C15H24 | 3.034 | 1.975 | 4.308 |
| 5 | α-金合欢烯 | C15H24 | 8.805 | 9.617 | 3.0577 |
| 6 | Δ-杜松烯 | C15H24 | 5.870 | 4.326 | 3.9268 |
| 7 | 棕榈酸 | C16H32O2 | 7.548 | 1.014 | 7.0657 |
| 8 | 亚油酸 | C18H32O2 | 0.459 | 0.109 | 0.5936 |
由表3-5可知，在青皮挥发油、陈皮挥发油和药对挥发油中有8种化学成分同时存在，分别为 共占药对挥发油总量的%。在青皮挥发油中，这8种化合物共占总量的%；在陈皮挥发油中，这8种化合物共占总量的%；在药对挥发油中，这8种化合物共占总量的%。这12种化学成分中有3种化学成分的百分含量在药对挥发油中明显升高，4种化学成分的百分含量在药对挥发油中明显降低，另外5种化学成分则没有显著变化。
3.3讨论
当今GC-MS 技术已经成为分析中药成分的非常有效手段。该技术能检测出单味药及药对中几乎全部的化合物，准确测定分子质量、化合物的化学式和分子结构、药对青皮-陈皮配伍前后挥发油中化合物的种类及含量变化。在药对的挥发油中有新增加的化学成分，也有消失的单味药材化学成分，其原因可能是在药对煎煮提取的过程中发生了一定的化学反应和物理变化，如水解反应、氧化反应、还原反应、增溶助溶作用等其具体作用类型有待进一步研究，也可能是化学成分在药对总挥发油中的占比过低，并未能被检出。中药，无论是单方、对药，还是复方，其药效都是其所含众多化学物质协同作用的结果。有关单味药配伍后，药对所含化学物质变化的机制及其对药理作用的影响有待深入研究。实验还有许多不足之处，例如上述分析结果中这些化学成分的变化是否可以判断为青皮-陈皮药对在药效上增效于单味药材的物质基础；没能对青皮-陈皮药对配伍前后陈皮中的指标成分如橙皮苷等黄酮类化合物进行含量测定，也可以采用不同分析法如超高效液相色谱-质谱联用技术对青皮-陈皮药对配伍前后挥发油的化学组分与百分含量进行定性定量分析；采用不同提取方法来提取药对挥发油，比如溶剂提取法、超临界流体萃取法等与水蒸气蒸馏法相比能否使青皮-陈皮药对配伍前后的挥发油中的化学成分及百分含量产生新的变化；此实验中青皮-陈皮药对的挥发油提取采取的是中药材合煎提取，如果采取各单味药材单煎后混合得到的药对挥发油能否对配伍前后挥发油中的化学成分及百分含量变化产生不同的影响，这些问题都需要进一步的研究探讨。
结论
本实验通过水蒸气蒸馏法提取青皮、陈皮和青皮-陈皮药对挥发油，并采用气相色谱质谱联用技术结合计算机检索对挥发油分离鉴定。青皮共有24种化学成分被鉴定出,且除棕榈酸甲酯和9，12-十八碳二烯酸甲酯外百分含量均大0.1%。含量较高的有β-榄香烯(43.84%)、β-橄榄烯（15.411%）等。从陈皮中共鉴定出39种化学组分，其百分含量均高于0.1%，鉴定出的39种化学成分中(1R)-(+)-α蒎烯（5.264%）、α-金合欢烯（9.617%）等所占比例较高。药对青皮-陈皮挥发油中被鉴定出来的且百分含量高于0.1%的化学成分有17种，其中1-石竹烯（20.5332%）、8，9-脱氢环异长叶烯（20.4711%）等相对含量较高。青皮和陈皮的挥发油中有12种相同的化学成分，分别为p-伞花烃、δ-榄香烯、β-榄香烯、1-石竹烯、α-石竹烯、γ-蛇床烯、α-蛇床烯、α-依兰油烯、α-金合欢烯、△-杜松烯、棕榈酸、亚油酸，其在青皮中的百分含量分别为0.457%、0.931%、11.262%、2.758%、3.034%、1.489%、3.696%、0.893%、8.805%、5.879%、7.548%、0.459%，在陈皮中的百分含量分别为1.402%、1.467%、4.275%、1.062%、1.975%、0.939%、2.373%、0.57%、9.617%、4.326%、1.014%、0.109%。在青皮挥发油和药对挥发油中有12种化学成分同时存在。共占药对挥发油总量的61.994%。在青皮挥发油中，这12种化合物共占总量的80.452%。这12种化学成分中有3种化学成分的百分含量在药对挥发油中明显升高，4种化学成分的百分含量在药对挥发油中明显降低，另外5种化学成分则没有显著变化。药对挥发油有9种成分与单味药陈皮的挥发油相同，这9种共有成分在药对挥发油中占据46.960%，在陈皮挥发油中占据57.230%。这9种成分的含量随着药对配伍后，有4种化合物的百分含量在药对挥发油中明显升高，3种化合物的百分含量在药对挥发油中显著降低，剩余两种化合物的百分含量随着药对配伍后没有明显变化。本实验为研究和开发青皮和陈皮及其药对的中药资源提供基础依据.
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